Utilización de glioblastomas en la obtención de medios condicionados para la generación de hibridomas muridos secretores de anticuerpos monoclonales / Use of glioblastomas in the obtention of conditioned media for the generation of murine hybridomas secreting monoclonal antibodies

Se ha demostrado que las células de glioblastoma humanoproducen interleucemia 6, la cual estimula la proliferación de plasmocitomas secretores de anticuerpos monoclonales. Con el objetivo de obtener medios condicionados se establecieron cultivos primarios de glioblastoma. Estos medios se utilizaron como suplemento en las fusiones de células de mieloma de ratón P3-X63Ag8.653 y esplenocitos de ratones BALB/C hiperinmunes. Se observaron cultivos con una eficiencia de fusión mayor con estos medios condicionados como suplemento, se se compara con aquéllos realizados con capas alimentadoras de macrófagos de la cavidad peritoneal de ratón o sin suplementos. Además ,en los clonajes y reclonajes se usó un clono secretor de anticuerpo monoclonal anti-A, que resultó muy estable, lo que sugiere que es posible obtener un incremento de hibridomas secretores de anticuerpos monoclonales de especificidad deseada en cultivos con factor de crecimiento de hibridoma derivado de glioblastoma

Estandarización de un método citoquímico para el estudio de la enzima esto 5'-nucleotidasa en linfocitos / Standarization of a cytochemical method for the study of Ecto-5'nucleotidase enzyme on lymphocytes

Se describe un método para la detección de la enzima ecto 5'nucleotidasa (5'NT) en linfocitos de sangre periférica. El estudio se realizó en 25 adultos sanos (10 mujeres y 15 hombres) con un rango de edad entre 19 y 44 años y una edad promedio de 30 años. La cantidad de células y de reactivos se redujo con respecto a otras técnicas. El rango de células 5'NT+ obtenido es de 18 a 40 por ciento , lo que se corresponde con lo informado por otros autores

Efecto de diferentes sueros y factores de crecimiento en las líneas de plasmacitomas de ratón P3/X-63-Ag8.653 y P3/NS-1/1 Ag 4-1 / Effect of different sera and growth factors in P3/x-63-Ag8.653 and P3/NS'1/1 Ag 4-1 lines of mouse plasmacytomas

Se estudió el efecto de diferentes sueros y medios condicionados en el crecimiento de las líneas X-63 y NS-1. Se utilizaron sueros: fetal bovino, de caballo, de terneros recién nacidos y de condón umbilical humano, a una concentración del 10 por ciento solos o en combinación con 2 por ciento de interleucina-6 o de factor estimulador de colonias no purificados (en medios condicionados). En condiciones de altas densidades celulares se obtuvo la mayor proliferación con el suero de caballo y con el de cordón umbilical y la adición de los factores estimuló preferencialmente el crecimiento de las células NS-1. A bajas densidades celulares se obtuvieron colonias multicelulares, con inóculos iniciales de 5-10 células/pozo, en presencia del suero de caballo o de cordón umbilical y en menor medida con el suero fetal bovino. Las eficiencias de siembre en placas también fueron superiores con ambos sueros

Efecto de diferentes sueros y factores de crecimiento en las líneas de plasmacitomas de ratón P3/X-63-Ag8.653 y P3/NS-1/1 Ag 4-1 / Effect of different sera and growth factors in P3/x-63-Ag8.653 and P3/NS'1/1 Ag 4-1 lines of ouse plasmacytomas

Se estudió el efecto de diferentes sueros y medios condicionados en el crecimiento de las líneas X-63 y NS-1. Se utilizaron sueros: fetal bovino, de caballo, de terneros recién nacidos y de condón umbilical humano, a una concentración del 10 por ciento solos o en combinación con 2 por ciento de interleucina-6 o de factor estimulador de colonias no purificados (en medios condicionados). En condiciones de altas densidades celulares se obtuvo la mayor proliferación con el suero de caballo y con el de cordón umbilical y la adición de los factores estimuló preferencialmente el crecimiento de las células NS-1. A bajas densidades celulares se obtuvieron colonias multicelulares, con inóculos iniciales de 5-10 células/pozo, en presencia del suero de caballo o de cordón umbilical y en menor medida con el suero fetal bovino. Las eficiencias de siembre en placas también fueron superiores con ambos sueros (AU)

Estandarización de un método citoquímico para el estudio de la enzima esto 5'-nucleotidasa en linfocitos / Standarization of a cytocheical method for the study of Ecto-5'nucleotidase enzyme on lymphocytes

Se describe un método para la detección de la enzima ecto 5'nucleotidasa (5'NT) en linfocitos de sangre periférica. El estudio se realizó en 25 adultos sanos (10 mujeres y 15 hombres) con un rango de edad entre 19 y 44 años y una edad promedio de 30 años. La cantidad de células y de reactivos se redujo con respecto a otras técnicas. El rango de células 5'NT+ obtenido es de 18 a 40 por ciento , lo que se corresponde con lo informado por otros autores (AU)

Utilización de glioblastomas en la obtención de medios condicionados para la generación de hibridomas muridos secretores de anticuerpos monoclonales / Use of glioblastoas in the obtention of conditioned media for the generation of murine hybridomas secreting monoclonal antibodies

Se ha demostrado que las células de glioblastoma humanoproducen interleucemia 6, la cual estimula la proliferación de plasmocitomas secretores de anticuerpos monoclonales. Con el objetivo de obtener medios condicionados se establecieron cultivos primarios de glioblastoma. Estos medios se utilizaron como suplemento en las fusiones de células de mieloma de ratón P3-X63Ag8.653 y esplenocitos de ratones BALB/C hiperinmunes. Se observaron cultivos con una eficiencia de fusión mayor con estos medios condicionados como suplemento, se se compara con aquéllos realizados con capas alimentadoras de macrófagos de la cavidad peritoneal de ratón o sin suplementos. Además ,en los clonajes y reclonajes se usó un clono secretor de anticuerpo monoclonal anti-A, que resultó muy estable, lo que sugiere que es posible obtener un incremento de hibridomas secretores de anticuerpos monoclonales de especificidad deseada en cultivos con factor de crecimiento de hibridoma derivado de glioblastoma (AU)

Expresión del receptor de interleucina-2 en linfocitos estimulados con mitógeno / Expression of interleukin-2 receptor in mitogen stimulated lymphocytes

Se establecieron las condiciones óptimas para la determinar la expresión del receptor de interleucina-2 en linfocitos normales estimulados con mitógenos mediante el mètodo de inmunofluorescencia indirecta. Se utilizó un anticuerpo monoclonal anti-receptor de interleucina-2 comercial y otro purificado en Cuba. Se encontró una expresión mayor del receptor en los linfocitos cultivados durante 144 horas con fitohemaglutinina a una concentración de 2,5 ug/10 células/mL. Ambos anticuerpos monoclonales marcaron adecuadamente las células. Se hallaron valores normales según las variables óptimas encontradas para el anticuerpo monoclonal purificado en Cuba: de cada 100 células, 26+9 fueron positivas para la expresión del receptor de interleucina-2 al sexto día en cultivo

Expresión del receptor de interleucina-2 en linfocitos estimulados con mitógeno / Expression of interleukin-2 receptor in itogen stimulated lymphocytes

Se establecieron las condiciones óptimas para la determinar la expresión del receptor de interleucina-2 en linfocitos normales estimulados con mitógenos mediante el mètodo de inmunofluorescencia indirecta. Se utilizó un anticuerpo monoclonal anti-receptor de interleucina-2 comercial y otro purificado en Cuba. Se encontró una expresión mayor del receptor en los linfocitos cultivados durante 144 horas con fitohemaglutinina a una concentración de 2,5 ug/10 células/mL. Ambos anticuerpos monoclonales marcaron adecuadamente las células. Se hallaron valores normales según las variables óptimas encontradas para el anticuerpo monoclonal purificado en Cuba: de cada 100 células, 26+9 fueron positivas para la expresión del receptor de interleucina-2 al sexto día en cultivo